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倉(cāng)鼠甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)elisa試劑盒操作步驟

更新時(shí)間:2022-02-24      點(diǎn)擊次數(shù):714

倉(cāng)鼠甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)elisa試劑盒操作步驟:


1.         標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為1800ng/L,1200ng/L ,600ng/L,300ng/L, 150ng/L)。


2.         加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品*終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。


3.         溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。


4.         配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。


5.         洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。


6.         加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。


7.         溫育:操作同3。


8.         洗滌:操作同5。


9.         顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.


10.     終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。


11.     測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

Aurora A+B+C有絲分裂激酶A/B/C抗體

phospho-ALK (Tyr1278 + Tyr1282 + Tyr1283)磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體

phospho-arfaptin 2 (Ser260)磷酸化ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白2抗體

Phospho-Aurora B (Thr232) + Aurora C (Thr198)磷酸化有絲分裂激酶B/C抗體

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APSAPS抗體

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phospho-A Raf (Ser214)磷酸化A-Raf抗體

ASAH2?;拾贝济擋C?抗體

ASAM脂肪細(xì)胞特異性粘附分子抗體

AAV5 capsid VP2 protein腺相關(guān)病毒5抗體

AMPK gamma 3腺苷酸活化蛋白激酶γ3抗體

AMPK beta 2腺苷單磷酸活化蛋白激酶β2抗體

phospho-APC1 (Ser355)磷酸化細(xì)胞周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體


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